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TRAzol伴侶(R1071)

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R1071(100次)

TRAzol伴侶

產品說明

TRAzol是經典的總RNA提取試劑,也是各家生物公司、實驗人員提取RNA最常用的試劑。東盛生物在使用TRAzol提取的傳統方法上,加以改進,推出TRAzol伴侶,簡化操作步驟,可在更短時間內獲得純度更高的RNA。本產品可搭配各公司TRIzol及其他基于酸酚/異硫氰酸胍提取原理的RNA提取產品,包括TRIzolTRIzol LSTRI Reagent等,從動物組織、植物組織、各種微生物、培養細胞等中提取總RNA。所得總RNA純度高,基本不含蛋白質及基因組DNA。提取的RNA可以直接用于Northern雜交、斑點雜交、mRNA純化、體外翻譯、RNA分解酶的保護分析、RT-PCR、構建cDNA文庫等各種分子生物學實驗。

 

產品組成

貨號

R1071100次)

溶液RPI

36 ml

溶液RW

24 ml

DEPC處理水

20 ml

RNase-free 純化柱

100

RNase-free 收集管

100

說明書

1

需要自備無水乙醇溶液

 

保存條件

室溫保存。

 

注意事項

●  嚴防操作環境、使用的容器、耗材和試劑的RNase污染。操作過程中勤換手套。

●  第一次使用前應在溶液RPI和溶液RW中加入無水乙醇,加入量為溶液RPI:無水乙醇=32,溶液RW:無水乙醇=14,即每36 ml溶液RPI需要加入24 ml無水乙醇,每24 ml溶液RW需要加入96 ml無水乙醇。

●  使用本產品提取的RNA一般不含有DNA污染。在極少數情況下(與組織pH值等相關),如果有DNA污染而又必須去除,則可以用RNase-freeDNase處理樣品。

●  請嚴格遵照操作步驟操作。

●  不同起始材料用量會影響RNA的產率。

 

操作步驟

第一次使用前應在溶液RPI、溶液RW中加入無水乙醇,加入量請參考瓶上標簽。

TRAzolCat. #R1021/R1022的使用手冊進行總RNA提取到經氯仿處理得到上清液。

2  緩慢加入0.5倍體積無水乙醇,混勻(此時可能會出現沉淀)。將得到溶液和沉淀一起轉入純化柱(純化柱+收集管)中,4℃ 12,000 rpm離心30 s4℃ 12,000 rpm離心30 s,棄掉收集管中的廢液。(若一次不能將全部溶液和混合物加入純化柱中,可以分兩次離心。)

3  向純化柱中加入500 μl溶液RPI(使用前請先檢查是否已按3:2加入無水乙醇,即含40%乙醇),4℃ 12,000 rpm離心30 s,棄廢液。

4  向純化柱中加入500 μl溶液RW(使用前請先檢查是否已按1:4加入無水乙醇,即含80%乙醇),室溫靜置2 min4℃ 12,000 rpm離心30 s,棄廢液。

5  重復上步操作,去除殘余液體。

6  將純化柱放回2ml收集管中,4℃ 12,000 rpm空離2 min,去除殘余液體。

注意:此步驟目的是將純化柱中殘余的漂洗液去除,離心后將純化柱在室溫放置片刻,或置于超凈工作臺上通風片刻,以充分晾干。如果有漂洗液殘留,可能會影響后續的RT等實驗操作。

7  將純化柱轉入一個新的1.5 ml離心管中,加30–100 μl RNase-free ddH2O,室溫放置2 min4℃ 12,000 rpm離心2 min

洗脫緩沖液體積不應少于30 μl,體積過小影響回收效率。RNA應保存在-70℃,以防降解。

注意:如果想提高RNA得率,可重復上步操作一次,合并兩次得到的溶液。


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